免疫組織化學(xué)應(yīng)用原則

應(yīng)用的基本原則
　　免疫組織化學(xué)染色在生物醫(yī)學(xué)研究中具有十分廣泛的作用。并且涉及許多研究領(lǐng)域。但是，免疫組織化學(xué)技術(shù)也有其局限性，例如，組織細胞內(nèi)的待測物質(zhì)要有抗原性，而且需要有一定濃度方可檢出；檢出的免疫反應(yīng)陽性蛋白不能被確定是細胞新合成的蛋白還是通過細胞間運輸而來的蛋白，因此，在實驗設(shè)計中應(yīng)充分考慮這些特點。如果實驗需要證明已知蛋白為何種細胞合成，需采用分子原位雜交技術(shù)解決。為引導(dǎo)初學(xué)者在實驗設(shè)計中合理巧妙地運用免疫組織化學(xué)技術(shù)，將其應(yīng)用的基本原則簡述如下： 　　1．確定細胞類型和形態(tài)組織細胞內(nèi)有些蛋白具有組織特異性，如膠質(zhì)原纖維酸性蛋白（gial fibrillary acidic protein，GFAP）只存在于星形膠質(zhì)細胞內(nèi)．神經(jīng)絲蛋白（Neurofilament，NF）只存在于神經(jīng)細胞內(nèi)。通常把這些具有組織特異性的蛋白稱為標(biāo)記性蛋白（Proteiniliaker）。通過標(biāo)記性蛋白的特異性抗體可確定細胞種類。有些細胞（如表皮內(nèi)朗格漢斯細胞和黑色素細胞等）在光鏡下不易辨認，通過對胞質(zhì)內(nèi)的特定蛋白實施免疫組化染色，便能清楚顯示此類細胞外形輪廓。這種作用在神經(jīng)科學(xué)研究和腫瘤臨床病理中顯得尤為重要。 　　2．辨認細胞產(chǎn)物的來源利用某些細胞產(chǎn)物為抗原，制備相應(yīng)的抗體，對組織細胞實施免疫組織化學(xué)染色，以確定細胞產(chǎn)物的來源。如內(nèi)分泌細胞產(chǎn)生的各種激素，大多數(shù)可用免疫組化染色技術(shù)辨認，據(jù)此可研究細胞的分泌功能及對內(nèi)分泌腫瘤作功能分類，檢測分泌異位激素的腫瘤等，了解細胞分化程度。  免疫組織化學(xué)染色法（DAB顯色）

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