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距離開(kāi)學(xué)只剩下10天了，第三季度也已開(kāi)始，上海恒遠(yuǎn)實(shí)驗(yàn)室為您整理了ELISA小結(jié)，在正式開(kāi)學(xué)之前分享發(fā)布給您。今天的小結(jié)內(nèi)容是相關(guān)實(shí)驗(yàn)結(jié)果不佳的原因分析－－標(biāo)本及采集、貯運(yùn)因素。

·嚴(yán)重溶血，以HRP為標(biāo)記的ELISA 測(cè)定中，殘留在孔內(nèi)的血紅蛋白具有過(guò)氧化物酶樣活性，催化底物顯色造成假陽(yáng)性；

·混有紅細(xì)胞的血清易沉淀或附著在聚乙烯孔內(nèi)不易洗凈;如有細(xì)菌污染，菌體中可能含有內(nèi)源性HRP，也會(huì)產(chǎn)生假陽(yáng)性反應(yīng)；

·標(biāo)本凝固不全，有時(shí)為了爭(zhēng)取時(shí)間快速檢測(cè)，常在血液還未開(kāi)始凝固時(shí)即強(qiáng)行離心分離血清，使血清中仍殘留部分纖維蛋白原，在ELISA測(cè)定過(guò)程中可以形成肉眼可見(jiàn)的纖維蛋白塊，易造成假陽(yáng)性結(jié)果；

·采血試管洗滌不徹底、反復(fù)使用易交叉污染；

·塑料試管能吸附抗原物質(zhì)，樣本久置在塑料管內(nèi)會(huì)使樣本內(nèi)抗原含量下降造成假陰性。

上海恒遠(yuǎn)說(shuō)明重點(diǎn)注意：

1. 血清標(biāo)本宜在新鮮時(shí)檢測(cè)，嚴(yán)重溶血標(biāo)本禁用。

2. 反復(fù)凍融會(huì)使抗體效價(jià)跌落，所以測(cè) 抗體的血清標(biāo)本如需保存作多次檢測(cè)，宜少量分裝冰存；

使用一次性玻璃試管或真空管采血管；

3. 并使用非抗凝標(biāo)本，肝素抗凝血漿會(huì)增加OD值，可能與高濃度肝素具有強(qiáng)大的負(fù)電荷能吸附酶標(biāo)記物不易洗脫有關(guān)；

3. EDTA、酶抑制劑可抑制ELISA系統(tǒng)中辣根過(guò)氧化物酶活性；

4. 血液標(biāo)本采集后必須使其充分凝固后再分離血清，或標(biāo)本采集時(shí)用帶分離膠的采血管或于采血管中加入適當(dāng)?shù)拇倌齽?/span>

上海恒遠(yuǎn)為您提供高質(zhì)量并且優(yōu)惠的elisa試劑盒、抗體、標(biāo)準(zhǔn)品、培養(yǎng)基、血清、生物試劑等實(shí)驗(yàn)室試劑產(chǎn)品。

原創(chuàng)作者：上海恒遠(yuǎn)生物科技有限公司

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