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點擊次數(shù):13044 發(fā)布時間:2019/11/14 9:11:39
怎樣保存已獲得的抗體?
抗體無論是保存還是運(yùn)輸都應(yīng)盡可能地避免反復(fù)凍融,收到抗體后請根據(jù)實驗的需要,對抗體進(jìn)行分裝,避免同一管抗體反復(fù)凍融(反復(fù)凍融會導(dǎo)致抗體空間結(jié)構(gòu)變 性,導(dǎo)致多聚體形成,從而降低抗體的結(jié)合能力)?贵w保存得當(dāng)與否,直接決定了抗體的活性和使用效果,如果抗體保存得當(dāng),抗體活性大部分都可以維持?jǐn)?shù)年。 請謹(jǐn)記,無論何時請按照說明書推薦的保存條件正確處理和保存抗體。
1.收到抗體后,請務(wù)必在4℃,12000rpm,離心3分鐘,(無論是液體還是凍干粉狀態(tài)),再打開管蓋進(jìn)行分裝和保存(如果抗體體積小于50ul,請延長 離心時間至5分鐘,以保證全部抗體均離心下來)?贵w一般使用特制的儲存管,只有在12000rpm離心3分鐘,才能將附著在管壁或蓋內(nèi)的抗體全部離心下 來(即使是在10000rpm離心也會離心不完全,導(dǎo)致出現(xiàn)抗體的量不足的現(xiàn)象)。
2.對于ProSci大部分抗體,比較合適的保存方式是,分裝后保存在-20℃或者-80℃。
(1)對絕大多數(shù)抗體來說,保存在-20℃就完全足夠了,沒有任何證據(jù)顯示保存在-80℃會更好。
(2)分裝可以zui大程度的降低反復(fù)凍融對抗體活性的損害,同時也降低了由于多次從同一管中吸取抗體造成的污染可能性。
(3)分裝的量以一次實驗用完為好,zui少不能少于10ul每份。因為分裝體積越小,抗體的濃度越可能會受到蒸發(fā)以及管壁吸附的影響。
(4)復(fù)融后的分裝抗體如果一次用不完,將剩余母液保存在4℃,避免再凍起來。
(5)抗體工作液應(yīng)該當(dāng)天配制當(dāng)天用完,4℃保存盡量不要超過1天。
(6)避免將抗體保存在自動除霜冰箱中,將抗體保存在冰箱里層,避免溫度變化造成反復(fù)凍融。
3.大部分抗體收到后4℃短暫保存1~2周對抗體活性沒有影響。
4.大部分抗體的運(yùn)輸條件:一般的運(yùn)輸過程需要1~2周的時間,所以是在低溫4℃的條件下來完成的。
4℃運(yùn)輸zui主要的目的是為了避免反復(fù)凍融對抗體活性的損害(如果使用干冰運(yùn)輸,那么收到時抗體是凍起來的,為了分裝就需要解凍,這就多了一次凍融的過程),所以運(yùn)輸過程中避免干冰運(yùn)輸。
原創(chuàng)作者:上海恒遠(yuǎn)生物科技有限公司
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