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ELISA實(shí)驗(yàn)常被問(wèn)到的問(wèn)題

點(diǎn)擊次數(shù):13043   發(fā)布時(shí)間:2020/4/14 11:44:52

    在操作酶聯(lián)免疫試劑盒實(shí)驗(yàn)時(shí),有很多技術(shù)問(wèn)題是比較常見且易錯(cuò)的,而就是這些問(wèn)題困惑不少實(shí)驗(yàn)操作員。上海恒遠(yuǎn)根據(jù)技術(shù)部的問(wèn)題處理總結(jié),整理出了幾個(gè)比較常見的問(wèn)題,跟著小編一起往下看吧:

    一、為什么必須設(shè)置復(fù)孔?
    為獲得更準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,強(qiáng)烈建議標(biāo)準(zhǔn)品及樣本進(jìn)行復(fù)孔檢測(cè),因?yàn)閺?fù)孔檢測(cè)可以:計(jì)算平均值,確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果更準(zhǔn)確;解決實(shí)驗(yàn)中誤操作造成的跳孔現(xiàn)象;計(jì)算CV值,對(duì)實(shí)驗(yàn)的操作和試劑盒的精密度進(jìn)行評(píng)估。

    二、重復(fù)性差怎么辦?
    1.樣品數(shù)量不一,加樣時(shí)間長(zhǎng)短不一(恒遠(yuǎn)來(lái)解決:重復(fù)某一樣品時(shí),加樣時(shí)間盡可能與次接近)。
    2.酶標(biāo)儀濾光片不對(duì)或輸入波長(zhǎng)不對(duì)(恒遠(yuǎn)來(lái)解決:TMB顯色用450/630波長(zhǎng))。
    3.酶標(biāo)儀測(cè)定重復(fù)性差(恒遠(yuǎn)來(lái)解決:校對(duì)酶標(biāo)儀)。

    三、為什么標(biāo)準(zhǔn)曲線線性較差?
    需要按照推薦方式保存標(biāo)準(zhǔn)品;溶解標(biāo)準(zhǔn)品之前需短暫離心,徹底收集粉末;確保標(biāo)準(zhǔn)品完全溶解和混勻,然后再進(jìn)行后續(xù)的系列稀釋步驟,確保每一步都充分混勻且精確移液;顯色的恰當(dāng)終止;選擇合適的數(shù)學(xué)擬合方程繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

    四、為什么所有試劑和檢測(cè)樣本要平衡至室溫后再進(jìn)行加樣操作?
    溫度是ELISA結(jié)合反應(yīng)的重要影響因素。為了使所有樣本在一致的溫度下反應(yīng),實(shí)驗(yàn)前務(wù)必將所有試劑平衡至室溫,包括檢測(cè)樣本。避免因溫度的動(dòng)力學(xué)反應(yīng)差異而導(dǎo)致ELISA檢測(cè)結(jié)果的不準(zhǔn)確。

    今天的資訊內(nèi)容就到這里了,上海恒遠(yuǎn)生物為您提供的酶聯(lián)免疫試劑盒安全可靠,規(guī)格有96T和48T兩種,主要代理品牌有美國(guó)非常知名的BIM、R&D、TSZ,歡迎您的來(lái)電咨詢。我司本著服務(wù)科研,以質(zhì)量求生存,以信譽(yù)求發(fā)展的精神,精益求精,力求做到更好。全體員工孜孜不倦為國(guó)內(nèi)科研事業(yè)單位以及高校等提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品服務(wù)!本公司優(yōu)質(zhì)elisa試劑盒具有質(zhì)量可靠,靈敏度好,更具有免費(fèi)代測(cè)及技術(shù)指導(dǎo)服務(wù),歡迎科研者來(lái)電詳詢!

原創(chuàng)作者:上海恒遠(yuǎn)生物科技有限公司

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